Golden Gate基因拼接试剂盒

一、 产品介绍

本产品用于多个片段与线性载体的拼接。其原理为先用ⅡS型限制性内切酶通过同一识别位点切出不同的粘性末端,再根据碱基互补配对原则,依靠粘性末端的特异性,使载体片段按顺序首尾相连,最后通过DNA连接酶将单链的断裂处接上。本产品选用的是BsaI限制性内切酶位点。

本产品适用于多个片段与载体的连接,片段数目可至5-10个,最终产物可达约10 kb,通常效率可达70%以上。

golden gate assembly gel

二、 使用说明

PCR程序: (37℃ 1min → 16℃ 1min) × 30 → 60℃ 5min → 4℃ 恒温

取10 μL反应结束后的体系转化100 μL感受态大肠杆菌DH5α。转化前可用琼脂糖电泳粗略观察连接情况。

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